活體基因?qū)雰x(也稱為基因轉(zhuǎn)染儀)是用于將外源基因?qū)牖铙w細(xì)胞的設(shè)備，常用于基因工程、細(xì)胞治療和基因功能研究等領(lǐng)域，其原理涉及電穿孔、化學(xué)轉(zhuǎn)染和病毒載體等多種方法。
1.電穿孔法是利用電場作用使細(xì)胞膜產(chǎn)生臨時的微孔，使外源基因能夠進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。通過電極產(chǎn)生高強(qiáng)度的脈沖電場，將細(xì)胞膜電穿孔。電場的作用下，細(xì)胞膜上的磷脂雙層結(jié)構(gòu)發(fā)生短暫的破裂，形成微孔，使外源基因能夠通過微孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。電穿孔法可以用于多種細(xì)胞類型，但對于某些細(xì)胞來說，電穿孔可能會導(dǎo)致細(xì)胞損傷或細(xì)胞死亡。
2.化學(xué)轉(zhuǎn)染法是利用化學(xué)物質(zhì)(如磷脂體或聚合物)與外源基因形成復(fù)合物，通過細(xì)胞膜的內(nèi)吞作用將復(fù)合物導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。通過提供適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)轉(zhuǎn)染試劑和條件，促使外源基因與細(xì)胞膜相互作用，形成復(fù)合物。細(xì)胞膜通過內(nèi)吞作用將復(fù)合物包裹進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，從而實現(xiàn)基因的導(dǎo)入。化學(xué)轉(zhuǎn)染法適用于多種細(xì)胞類型，但轉(zhuǎn)染效率可能相對較低。
3.病毒載體法是利用病毒作為基因載體，將外源基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)。通過提供合適的病毒載體，將外源基因插入病毒基因組中，并通過病毒復(fù)制和感染機(jī)制將基因?qū)肽繕?biāo)細(xì)胞。病毒載體法通常可以實現(xiàn)較高的基因轉(zhuǎn)染效率，但需要注意選擇合適的病毒載體，以避免潛在的病毒感染和免疫反應(yīng)。
總的來說，活體基因?qū)雰x的原理是通過電穿孔、化學(xué)轉(zhuǎn)染或病毒載體等方法，將外源基因?qū)牖铙w細(xì)胞。不同的方法適用于不同的細(xì)胞類型和研究需求。在實際應(yīng)用中，需要根據(jù)具體情況選擇合適的導(dǎo)入方法，并進(jìn)行優(yōu)化和調(diào)整，以獲得基因轉(zhuǎn)染效果。
